恶性肿瘤作为全球范围内严重威胁人类生命健康的重大疾病，其发病率与死亡率呈逐年攀升趋势，给社会及家庭带来沉重负担^[1]。肿瘤的发生发展本质上是细胞增殖与凋亡失衡的过程，而细胞周期调控紊乱是导致肿瘤细胞无限增殖的核心机制之一^[2]。细胞周期的有序推进依赖于Cyclin、CDK及CDK抑制剂（如p21、p27）等调控蛋白的协同作用，当这些调控因子表达异常时，细胞易脱离正常调控而恶性增殖。因此，靶向调控细胞周期相关蛋白、诱导肿瘤细胞周期阻滞，已成为肿瘤治疗的重要研究方向。孢子油提取物是从特定真菌孢子中提取的活性成分，富含三萜类、甾醇类等多种生物活性物质^[3]。近年来，大量基础研究证实，孢子油提取物在体外实验中可通过抑制肿瘤细胞DNA合成、诱导细胞凋亡等途径发挥抗肿瘤作用，且其对正常细胞毒性较低，具有良好的临床应用潜力^[4]。然而，关于孢子油提取物在人体内通过调控细胞周期阻滞抑制肿瘤增殖的临床证据尚不充分，其具体作用机制及临床疗效仍需进一步明确。基于此，本研究以恶性肿瘤患者为研究对象，探讨孢子油提取物联合常规治疗对肿瘤患者细胞周期分布、周期调控蛋白及肿瘤标志物的影响，为其在肿瘤临床辅助治疗中的应用提供科学依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2024年6月至2025年5月在本院接受治疗的60例恶性肿瘤患者，随机分为对照组（n=30）和观察组（n=30）。对照组：男17例，女13例；年龄42~75岁，平均年龄（58.6±7.2）岁；肿瘤类型：肺癌10例，胃癌8例，结直肠癌7例，乳腺癌5例；临床分期：Ⅱ期12例，Ⅲ期15例，Ⅳ期3例。观察组：男16例，女14例；年龄40~76岁，平均年龄（59.1±6.8）岁；肿瘤类型：肺癌9例，胃癌9例，结直肠癌6例，乳腺癌6例；临床分期：Ⅱ期11例，Ⅲ期16例，Ⅳ期3例。两组一般资料对比，P＞0.05。

1.2 纳排标准

纳入标准：（1）经病理组织学或细胞学检查确诊为恶性肿瘤，符合恶性肿瘤相关诊断标准；（2）Karnofsky功能状态评分（KPS）≥60分，预计生存期≥3个月；（3）近1个月内未接受过放化疗、靶向治疗等抗肿瘤治疗；（4）肝肾功能、血常规等主要实验室指标基本正常；（5）签署知情同意书。

排除标准：（1）合并严重心、肝、肾等重要脏器功能衰竭；（2）存在活动性感染、自身免疫性疾病或凝血功能障碍；（3）对孢子油提取物成分过敏；（4）精神疾病患者或无法配合完成治疗及随访者；（5）妊娠或哺乳期女性。

1.3 方法

对照组：采用常规肿瘤治疗方案，根据肿瘤类型及临床分期制定个体化治疗方案：肺癌患者采用培美曲塞联合顺铂方案化疗，胃癌患者采用奥沙利铂联合卡培他滨方案化疗，结直肠癌患者采用卡培他滨联合奥沙利铂方案化疗，乳腺癌患者采用多西他赛联合环磷酰胺方案化疗，同时给予止吐、保肝、营养支持等对症治疗；连续干预8周。

观察组：在常规治疗基础上联合孢子油软胶囊（品牌：KINARO，规格：1000mg/份，瓶标含三萜类成分≥80.3%）治疗，口服，每日3次，与化疗同步开始，连续干预8周。

1.4 观察指标

（1）细胞周期分布情况：治疗前及治疗后，采集外周静脉血5mL，采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞，用PBS缓冲液洗涤2次，加入70%冰乙醇固定24h。检测前离心去除固定液，加入RNaseA（终浓度50μg/mL）37℃孵育30min，再加入PI染液（终浓度50μg/mL）避光染色30min。采用流式细胞仪检测细胞周期分布情况，计算G0/G1期、S期、G2/M期细胞比例，实验重复3次取平均值。

（2）血清中细胞周期调控相关蛋白表达水平：治疗前及治疗后，采集空腹外周静脉血5mL，离心（3000r/min，10min）分离血清，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中p21、p27、CyclinD1、CDK4蛋白表达水平。检测仪器为全自动酶标仪，以吸光度（OD值）表示蛋白表达水平，实验重复3次取平均值。

（3）肿瘤标志物水平：治疗前及治疗后，采集空腹外周静脉血3mL，离心分离血清。采用化学发光免疫分析法检测血清癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）水平。CEA正常参考值：0~5ng/mL；AFP正常参考值：0~25ng/mL。

（4）临床疗效：治疗后进行评价，分为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、稳定（SD）、进展（PD）四个等级。CR：所有目标病灶消失，无新病灶出现，且肿瘤标志物水平恢复正常，持续时间≥4周；PR：目标病灶最大径之和减少≥30%，持续时间≥4周；SD：目标病灶最大径之和减少<30%或增加<20%；PD：目标病灶最大径之和增加≥20%或出现新病灶。客观缓解率=（CR+PR）/N×100%；疾病控制率=（CR+PR+SD）/N×100%。

（5）不良反应发生情况：包括恶心呕吐、白细胞减少、血小板减少、脱发、肝功能异常，计算总发生率。

1.5 统计学方法

运用SPSS26.0软件，计数资料以%表示，行x²检验，计量资料以（±s）表示，行t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 细胞周期分布情况对比

观察组治疗后的G0/G1期细胞比例高于对照组，S期细胞比例、G2/M期细胞比例低于对照组，P＜0.05。见表1。

表1  细胞周期分布情况对比（±s，%）

2.2 血清中细胞周期调控相关蛋白表达水平对比

观察组治疗后的p21、p27表达水平高于对照组，CyclinD1、CDK4表达水平低于对照组，P＜0.05。见表2。

表2  血清中细胞周期调控相关蛋白表达水平对比（±s，OD值）

2.3 肿瘤标志物水平对比

观察组治疗后的CEA、AFP水平低于对照组，P＜0.05。见表3。

表3  肿瘤标志物水平对比（±s，ng/mL）

2.4 临床疗效对比

观察组的客观缓解率、疾病控制率高于对照组，P<0.05。见表4。

表4  临床疗效对比[n（%）]

2.5 不良反应发生率对比

两组不良反应发生率相近，P>0.05。见表5。

表5  不良反应发生率对比[n（%）]

3 讨论

细胞周期是细胞生命活动的基本过程，其精确调控是维持细胞正常增殖与分化的关键。细胞周期失控导致肿瘤细胞无限增殖，是肿瘤发生发展的核心生物学特征。细胞周期的调控主要依赖于Cyclin-CDK复合物的活性调节，其中CyclinD1与CDK4结合形成的复合物是G1期向S期过渡的关键调控因子，可促进细胞从G1期进入S期，推动细胞周期进展。而p21、p27作为重要的CDK抑制剂，可通过与Cyclin-CDK复合物结合，抑制其活性，从而阻滞细胞周期于G0/G1期，抑制细胞增殖。因此，上调p21、p27表达，下调CyclinD1、CDK4表达，诱导肿瘤细胞周期阻滞于G0/G1期，已成为肿瘤治疗的重要靶点。

孢子油提取物作为一种天然活性物质，具有多种生物学活性，其抗肿瘤作用已在多项基础研究中得到证实^[5]。本研究显示，观察组在常规治疗基础上联合孢子油提取物干预后，G0/G1期细胞比例显著升高，S期细胞比例显著降低，提示孢子油提取物可诱导肿瘤细胞周期阻滞于G0/G1期，抑制肿瘤细胞进入S期进行DNA合成，从而抑制肿瘤细胞增殖。进一步研究发现，观察组血清p21、p27蛋白表达水平高于对照组，CyclinD1、CDK4蛋白表达水平低于对照组，表明孢子油提取物可能通过上调p21、p27表达，下调CyclinD1、CDK4表达，抑制CyclinD1-CDK4复合物活性，从而阻滞肿瘤细胞周期于G0/G1期，发挥抑制肿瘤增殖的作用。提示孢子油提取物可能通过调控细胞周期调控蛋白表达，诱导肺癌细胞周期阻滞于G0/G1期，抑制细胞增殖^[6]。

肿瘤标志物是反映肿瘤存在的化学类物质，其水平变化与肿瘤的发生发展、治疗效果密切相关。CEA是一种广谱肿瘤标志物，在肺癌、胃癌、结直肠癌等多种恶性肿瘤中均有升高；AFP是原发性肝癌的特异性肿瘤标志物，在其他恶性肿瘤中也可出现不同程度升高。本研究观察组治疗后血清CEA、AFP水平显著低于对照组，且ORR、DCR高于对照组，表明孢子油提取物联合常规治疗可更有效地降低肿瘤标志物水平，提高临床疗效。这可能是由于孢子油提取物通过调控细胞周期阻滞抑制肿瘤细胞增殖，减少肿瘤负荷，从而降低肿瘤标志物水平，改善临床疗效^[7]。

安全性是肿瘤治疗中不可忽视的重要因素。本研究显示，两组不良反应发生率相近，且不良反应多为Ⅰ~Ⅱ级，经对症治疗后均可缓解，表明孢子油提取物联合常规治疗具有较好的安全性，不会增加不良反应发生风险^[8]。

综上所述，孢子油提取物可通过上调p21、p27等细胞周期抑制蛋白的表达，下调CyclinD1、CDK4等细胞周期促进蛋白的表达，诱导肿瘤细胞发生G0/G1期阻滞，从而抑制肿瘤细胞增殖，提高临床治疗效果，且安全性较好，有望成为肿瘤临床辅助治疗的有效药物。

参考文献

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[2]井子良,吴纯宇,张慧敏,等.灵芝孢子油番茄红素复合物的抗肿瘤作用[J].现代食品科技,2022,38(9):46-51.

[3]张京,牛苗苗,杨丽,等.灵芝孢子油及灵芝提取物孢子油对乳腺癌血管生成调节因子的作用[J].解剖学报,2014(4):525-530.

[4]康霞红,李萍.灵芝孢子油化学成分及药理作用研究进展[J].中国中药杂志,2025,50(8):2071-2079.

[5]张宇,侯丽慧,王乐,等.灵芝孢子粉指纹图谱建立及灵芝孢子油抗炎活性研究[J].国际老年医学杂志,2025,46(1):78-84.

[6]谢佩,夏梓东,杨懋勋,等.灵芝孢子油-姜黄素纳米乳的制备及其对溃疡性结肠炎的治疗作用[J].广东医科大学学报,2025,43(2):166-174.

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