混合斑也称之为两名或者两外以上的个体的混合生物检材。当DNA分型出现两个或者多个人的混合分型时，主要出现大型的命案或者性犯罪，样本出现微量混合性的特征较多^[1]。从法医学检查当中可知，混合斑类检材多以强奸案件中的检材，多人受伤的作案、强奸案或者其他案件中的咬痕拭子或者指甲坂、带血的衣物等。混合斑的样本进行研究时受到的挑战较多影响，而且检材分离的难度较高。而且各类的分型结果会出现基因相互重叠、相互并存的情况，所以选择合理的方法开展混合斑分析，以为案件的破获提供有利的依据十分重要，详见下文：

1 资料与方法

1.1一般资料

对我司在2022年10月份开展的一起抢劫案件当中的混合DNA进行人工拆分，对嫌疑人的图谱进行确定，以为破案提供有利的依据。

1.2方法

嫌疑人，李某，年龄在35岁左右，身高约175左右，从其家窗户进入室内进行抢劫。对现场的样本进行提取，样本为剪子、尖刀，提取样本的位置为剪子和尖刀的把手部位，提取的方式为使用干棉签反复擦拭该部位。进行检查时，两种检材属于接触类，剪子为被害人家中自有，当中被害人使用该器械进行了抵抗。而尖刀作为嫌疑人所持有的，嫌疑人和被害人对尖刀开展过争夺，考虑尖刀存在混合基因型的机率较高^[2]。

控制好擦拭的范围，避免提取细菌过少或者范围过大导致无得取得满意的STR分型。提取DNA的方法为Chelex-100；使用QiagenII试剂盒进行纯化并浓缩，使用1.4ul的模板开展梯度扩增，使用3150型基因分析仪进行电泳分析。

1.3观察指标

分析检验的结果。

1.4统计学方法

参与本次研究当中，文中所生成的数据均使用SPSS21.0数据包处理，计数用(n%)代表率行X²检验，P<0.05 显现检验结果有意义。

2  结果

通过对尖刀开展1.4ul模板开展扩增，扩增后的分型一致，对11个基因座进行分析，出现三个或者四个等位的基因峰，均为两个个体的混合，而这些基因座，包括了被害人的全部基因类型，考虑混合型为被害人嫌疑人的混合。依据混合分型中的基因座有四位等位基因峰，依据vWA基因座与混合样本比例分析准确率更高，而且无基因共享的情况，考虑嫌疑人和被害人的混合比例约为2：3。同时对基因峰不等高现象，推断大峰作为供体的共享峰的纯合子。详见下表：

3  讨论

从本案的送检结果可知，本次送检的尖刀刀柄当中存在混合分型，数量为1个，该分型当中包括了被害人，还有1名男性，而结合本案进行分析，考虑该供体为嫌疑人。结合混合分型当中的无基因共享中有四个等位基因^[3]。对混合供体的比例进行分析，考虑为2：3，之后对逐个基因座进行扣除，使得已知供体被扣除，将未知的供体基因型有效的拆出。并将得出的数据录入到数据库当中，之后与犯罪嫌疑人的基因分型开展比对，以实现破获案件的目的。

通过本案可知，进行混合样本DNA分析，应做好等位基因共享的分析，而且混合样本的各供体的等位基因在混合图谱中的表现并不明显，使得混合班的杂合型均衡比判断造成影响。而杂合子扩增不均衡会对混合班基因型的判断造成影响，应在分析混合斑时使得杂合型均衡比例在60%以上^[4]。

综上所述，在开展DNA分型检测时，对嫌疑人DNA分型时应小心，避免外界因素的影响，同时对峰高/峰面积等信息进行综合 分析，不凭借主观的臆断混合样本进行分析，导致分型结果错误。

   参考文献

［1］王巍巍,郭宁,张曙光,等.混合斑分析与其在法医学中的应用[J].锦州医科大学学报, 2019, 40(5):6.

［2］刘京,何光林,侯一平,et al.大规模平行测序在混合斑检测分析中的应用前景[J].法医学杂志, 2019, 35(1):6.

［3］孟孟,张轶轮,李敏,等.Y染色体遗传标记在法医学中的应用[J].中国司法鉴定, 2019(1):8.

[4]王守宇,陶瑞旸,侯一平,et al.RNA表达分析在法医学体液斑鉴定中的应用与展望[J].法医学杂志, 2022, 38(6):763-773.